1.诊断典型者或虽不典型但考虑到本病者，一般诊断多无困难。
由于X线表现出现较晚，早期确诊往往较难。
临床诊断主要依据：①全身中毒症状严重，伴有不明高热者，应想到组织深部感染，其中包括化脓性脊柱炎;②在前者基础上，伴有腰部疼痛、叩痛及活动受限等，则应拟诊化脓性脊柱炎，边治疗边观察;③X线表现最短需10天，一般多在2～3周开始显示，3周以上则可见本病典型影像，易于确诊;④此外还可参考血培养、椎旁抽出物检查(非必要时一般不做)及化验室检查等。
2.鉴别诊断典型者，尤其病变后期一般勿需与其他疾患鉴别。
但不典型者，则应与以下病变鉴别。
(1)风湿症：
十分多见，且易伴有腰背部症状及发热。但本病有以下特点：游走性关节痛;侵犯多关节，且较表浅;对阿司匹林类药物反应敏感;全身中毒症状较轻;血培养阴性，抗“O”试验多阳性。
(2)类风湿性关节炎：
根据本病特点与化脓性脊柱炎鉴别，即主要累及四肢手足的小关节;双侧对称性发病，后期手足变形;腰部偶可伴发.但症状轻微;类风湿因子多为阳性;全身无明显炎性反应。
(3)脊柱结核：
亦易混淆，但本病特点为发病及病程十分缓慢;多有结核病史及慢性消耗体质;以胸腰段多见，实物试验多阳性;x线片以破坏为主，尤以椎间隙多明显受累，甚至消失;椎旁脓疡发生率高于化脓性者，尤其是腰大肌或椎旁阴影明显增宽。
(4)其他：
此病尚应与伤寒性脊柱炎(可根据肥达反应等)、强直性脊柱炎(起病于双侧骶髂关节并向上发展等)及波浪热(流行病史等)等疾患鉴别。